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上海信帆為大家詳述關(guān)于ELISA試劑盒的構(gòu)成以及測定步驟

更新時間:2014-02-11      瀏覽次數(shù):2105

ELISA試劑盒擁有穩(wěn)定的重復性和可靠,是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。下面以96T的為例來給大家介紹關(guān)于ELISA試劑盒的構(gòu)成以及測定步驟:

  試劑盒組成

130 倍濃縮洗滌20ml×1 瓶7終止液6ml×1 瓶
2酶標試劑6ml×18標準品(32ng/ml)0.5ml×1 瓶
3酶標包被板12 孔×8 條9標準品稀釋液1.5ml×1 瓶
4樣品稀釋液6ml×1 瓶10說明書1 份
5顯色劑A 液6ml×1 瓶11封板膜2 張
6顯色劑B 液6ml×1 瓶12密封袋1 個

 完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:

  (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

  (2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);

  (3)酶的底物;

  (4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);

  (5)結(jié)合物及標本的稀釋液;

  (6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

  (7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

 測定步驟                            
1.加樣                            
    1. 除包被外都需45度加樣                        
    2.加樣體積要準確                        
    3.管底加樣,不能加在管壁上                        
    4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡                        
2.溫浴                            
    1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。                        
    2.各ELISA板不應疊在一起。                        
    3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。                        
    4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。                        
3.洗滌                            
    1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。                        
    2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。                        
4.讀板                            
    1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。                        
    2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

上海信帆專業(yè)代理銷售ELISA試劑盒,提供技術(shù)指導,售后服務!如果你有不清楚的地方,歡迎大家來電來函!我們一定竭誠為大家提供的服務!

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