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ELISA和生化樣本的準備要求有哪些

更新時間:2023-08-30      瀏覽次數(shù):371

ELISA和生化樣本的準備要求有哪些

上海信帆生物通過ELISA和生化實驗檢測服務(wù),樣本的準備方法如下,以下所有樣本必須盡量新鮮!

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(μL)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,研磨儀(KZ-5F-3D)勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000rpm/min,離心10min,取上清液進行測定。


2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2h內(nèi)或4℃過夜后于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。


3、血漿樣本(干冰運輸)

1.生化、ELISA:可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

2.凝血四項:抽取靜脈血,按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸櫞酸鈉抗凝管中,輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊,不得形成泡沫。

3.采樣后應(yīng)盡快分離血漿(60分鐘內(nèi)進行),將標本以3000rpm/min離心10-15min,使血漿分層,取上層血漿。

4.分離后的血漿-20℃以下密封可保存2周。干冰運輸。


4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于4℃,3000rpm/min離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。


5、全血樣本(4℃運輸)

EDTA抗凝管取適量抗凝全血。EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL,樣本量不可太多或太少,取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運輸,不可與冰袋直接接觸,不可猛烈撞擊。抗凝全血僅用于血常規(guī)檢測,不可運輸后再離心取血漿。


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