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GUS染色試劑盒可配置多少染色液

更新時間:2022-07-14      瀏覽次數:822

GUS染色試劑盒可配置多少染色液


GUS染色試劑盒 (GUS Staining Kit) 采用經典的組織化學方法,通過與底物的顏色反應來對植物中gus基因融合標記進行快速檢測。


gus基因存在于大腸桿菌E.coli等一些細菌基因組內,其表達產物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS,β-glucuronidase,β-D-葡萄糖苷酸酶)是一種水解酶,能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質的水解。因為絕大多數植物細胞內不存在β-葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此gus基因是轉基因植物常用的報告基因之一,尤其是在研究外源基因瞬時表達的轉化實驗中被廣泛應用。

β-葡萄糖苷酸酶可以將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯(X-Gluc)分解為藍色的不溶物質,因此用含有X-Gluc底物的染色液浸泡轉gus基因植物,具有GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。其檢測方法簡單、快速、靈敏、穩定,且背景活性低。


本試劑盒包含GUS染色的全部試劑,使用方便,只需將配制好的X-Gluc溶液和染色緩沖液按照比例混合即配成GUS染色液。該試劑盒可以配制50ml的GUS染色液。



保存條件:

1.X-Gluc -20℃避光保存,X-Gluc溶解液室溫保存,GUS染色緩沖液4℃保存。未配制的試劑盒按照溫度貯存,有效期2年。

2.配制好的X-Gluc溶液(50×) -20℃避光保存30天,長期-80℃保存。


注意事項:

1.GUS染色工作液好現用現配,短期貯存可以-20℃保存2-3天。

2.X-Gluc溶液(50×) 應避免反復凍融,否則染色效率會下降,因此建議按照單次使用量分裝貯存。

3.由于植物組織特異性等原因,藍色顏色反應可能不*相同,請根據實際情況摸索具體的實驗條件,調整樣品制備方法和染色時間。對于擬南芥的根、花、葉片,以及煙草幼苗的根就可以不做任何預處理而直接染色。但是對于煙草和馬鈴薯的莖和葉就必須先剪切成薄片(約1-3mm)再進行染色。當操作更大的組織樣品時,可以選用真空滲透法來促進染色工作液滲入細胞。

4.為了您的安全和健康,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。


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