溶酶體紅色熒光探針工作液的配置
Lyso-Tracker Red是一種溶酶體(lysosome)紅色熒光探針，可以用于活細胞溶酶體特異性熒光染色。
Lyso-Tracker Red可以選擇性地滯留在偏酸性的溶酶體中，從而實現對于溶酶體的特異性熒光標記。中性紅(Neutral Red)和吖啶橙(Acridine Orange)也都可以對溶酶體進行熒光染色，但中性紅和吖啶橙的染色缺乏特異性。
使用說明：
1. Lyso-Tracker Red工作液的配制：
a. 取少量Lyso-Tracker Red按照1:13333-1:20000的比例加入到細胞培養液或適當的溶液(例如含鈣鎂離子的HBSS)中，使終濃度為50-75nM。例如取1µl Lyso-Tracker Red加入到20ml或13.33ml細胞培養液或適當的溶液(例如含鈣鎂離子的HBSS)中。混勻后即為Lyso-Tracker Red工作液。HBSS with Ca2+ & Mg2+ 。
b. Lyso-Tracker Red工作液使用前需37℃預溫育。
注：工作液中Lyso-Tracker Red的濃度可以根據實際情況進行適當調整。為降低背景，在染色效果可以接受的范圍內，建議盡量使用較低濃度的Lyso-Tracker Red。
2. 溶酶體的熒光標記：
a. 去除細胞培養液，加入步驟1配制好的并37℃預溫育的Lyso-Tracker Red染色工作液，與細胞37℃共孵育30-120分鐘。
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b. 去除Lyso-Tracker Red染色工作液，加入新鮮的細胞培養液。
c. 隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進行觀察。此時可觀察到溶酶體呈明亮的強熒光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Lyso-Tracker Red染色工作液中Lyso-Tracker Red的濃度或在推薦的時間范圍內適當延長染色時間。
注意事項：
Lyso-Tracker Red(1mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。對于微量的液體，每次使用前先離心數秒鐘，使液體充分沉降到管底。
更新時間：2021-02-02 
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