脯氨酸(PRO)檢測試劑盒后結果如何計算

產品說明：

脯氨酸(Pro)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，逆境條件下，植物體內 Pro 含量顯 著增加。Pro 增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性強的品種往往積累較多的脯氨酸。因此， 脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。 用磺基水楊酸（SA）提取 Pro，加熱處理后，Pro 與酸性茚三酮溶液反應生成紅色；加甲苯萃 取后，在 520nm 測定吸光度。

樣品測定的準備：
1、細胞、細菌或組織樣品的制備 ：
細菌或細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，棄上清；按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，
超聲波破碎細菌或細胞（功率 20％，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復 30 次），之后置沸水浴振蕩提取
10min；10000g，常溫離心 10min，取上清，冷卻后待測。
組織：稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿；之后置沸水浴振蕩提取 10min，10000g，
常溫離心 10min，取上清，冷卻后待測。
2、血清（漿）樣品：取 100µL 血清（漿）加入 0.9mL 提取液，充分混勻，之后置沸水浴振蕩提取
10 分鐘，10000g，常溫離心 10 分鐘，取上清，冷卻后待測。
3、標準品的處理：稱取 1mg，將標準品稀釋為 15、10、8、6、4、2、1、0 µg/ml。

計算方法；
1、通過標準曲線計算樣品脯氨酸含量(y 為脯氨酸含量，µg/mL；x 為 OD 值)
2、按照細菌、細胞個數或者組織鮮重計算，首先根據標準曲線求得 y 值：
細胞或細菌中脯氨酸含量(µg/104 cell)= y÷細胞濃度(104 cell/mL)
Pro 含量(µg/g mass) =y÷樣本鮮重(g/mL)
3、血清（漿）中脯氨酸含量，首先根據標準曲線求得 y 值：
Pro 含量[µg/mL 血清（漿）] = y÷0.1mL 血清（漿）/mL
注意：提取液中含有蛋白沉淀劑，提取的上清液不能用于蛋白濃度的測定

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