超氧化物歧化酶(SOD)提取液使用說明
超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD),別名肝蛋白、簡稱:SOD。SOD是一種源于生命體的活性物質,能消除生物體在新陳代謝過程中產生的有害物質。對人體不斷地補充SOD具有抗衰老的特殊效果。
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD)是1938年從牛紅血球中分離得到超氧化物歧化酶開始算起,人們對SOD的研究己有七十多年的歷史。1969年McCord等重新發現這種蛋白,并且發現了它們的生物活性,弄清了它催化過氧陰離子發生歧化反應的性質,所以正式將其命名為超氧化物歧化酶。
操作方法;
1、植物組織樣品:取正?;蚰婢诚碌男迈r植物組織,清洗干凈,擦干,切碎,迅速稱取,按植物組織:超氧化物歧化酶(SOD)提取液=的比例,加入預冷的超氧化物歧化酶(SOD)提取液,冰浴情況下充分搗碎或研磨,用超氧化物歧化酶(SOD)提取液沖洗研缽或勻漿器,合并沖洗液至該離心管,補加超氧化物歧化酶(SOD)提取液至10ml,離心10min,取上清液(SOD粗提液)用于酶活性的測定。
2、動物組織樣品:動物用含有20U/ml Heparin的生理鹽水(0.9% NaCl containing 20U/ml Heparin)灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg組織加入500μl SOD檢測緩沖液的比例,用玻璃勻漿器在4℃或冰浴勻漿,離心10min,取上清液(SOD粗提液用于酶活性的測定。
3、血漿或含紅細胞的樣品:從待測樣品中分理出的血清或血漿不應有溶血,如果含有應去除紅細胞后檢測,如超過檢測范圍,用超氧化物歧化酶(SOD)提取液稀釋后檢測。血清去除紅細胞的簡易方法如下:用抗凝管收集血液,顛倒混勻,取至少500μl全血,4℃ 3000g離心5min,轉移上清至另一新的1ml離心管中,適量生理鹽水稀釋后待測。亦可采用紅細胞裂解液去除紅細胞,如Leagene ACK紅細胞裂解液等。
注意事項:
1、 待測樣品中不能含有磷酸酶抑制劑,同時需避免反復凍融。
2、 所測樣本的值高于標準曲線的上限,用超氧化物歧化酶(SOD)提取液稀釋樣品后重新測
定。
3、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
超氧化物歧化酶(SOD)提取液使用說明