小鼠促生長激素釋放激素（GHRH)elisa 試劑盒*，買二送一！

生長激素釋放激素（GHRH）由下丘腦弓狀核神經(jīng)元合成并釋放入垂體門脈系統(tǒng)后，與垂體生長激素細(xì)胞表面的生長激素釋放激素圖冊(cè)生長激素釋放激素受體（GHRHR）結(jié)合后,活化非選擇性離子通道,使細(xì)胞膜去極化,促進(jìn)鈣離子內(nèi)流和GH分泌.本藥盒利用人血清中樣品GHRH與其示蹤物125I-GHRH與特異性GHRH抗體競爭結(jié)合反應(yīng)，形成125I-GHRH-GHRHAb;GHRH-GHRHAb復(fù)合物，加入（IgG）分離劑。利用分離劑分離出復(fù)合物，并測(cè)定復(fù)合物中的放射性計(jì)數(shù)。通過數(shù)據(jù)處理求出樣品中GHRH的濃度。本藥盒為定性測(cè)定，用血量少，直接加樣，操作簡便，快速。

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實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠促生長激素釋放激素（GHRH）水平。用純化的小鼠促生長激素釋放激素（GHRH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促生長激素釋放激素（GHRH），再與HRP標(biāo)記的促生長激素釋放激素（GHRH）抗 體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促生長激素釋放激素（GHRH）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），通過標(biāo) 準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠促生長激素釋放激素（GHRH）濃度。

操作步驟：
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
48ug/L    5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
24ug/L    4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12ug/L    3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ug/L    2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3ug/L    1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl， 然后再加待測(cè)樣品 10µl（樣品終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

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4.配液：將 2 0 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 2 0 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
     10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

相關(guān)產(chǎn)品如下：

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人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA Kit
人17羥孕酮(17-OHP)ELISA Kit
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小鼠apelin 12(AP12)ELISA Kit

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