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免疫組化切片需注意

更新時間:2017-01-06      瀏覽次數(shù):1845

    切片組織得到很好處理后在進行切片之前還應對玻璃片進行處理,由于我們檢測抗原是多種多樣的,因染色操作程序復雜,時間較長,有些抗原是要進行各種抗原修復處理,如微波、高壓、水溶酶等,玻片如果得不到很好的處理,將易造成脫片,為保證免疫組化實驗的正常進行,要求在貼片前對載玻片作適當處理,必須在清洗干凈的玻片上進行粘合劑的處理以防脫片。
1)Poly-L-Lysine 
一般采用分子量30000左右的0.5%多聚賴氨酸,也可用試劑公司出售的其濃溶液以1:10去離子水稀釋。方法是將玻片浸泡其中,傾盡余液,在60℃溫箱中烤干備用,此方法的優(yōu)點是可以用于多種組織化學、免疫組化及分子學檢測中的應用,粘貼效果,但價格稍貴。
2)明膠硫酸鉻鉀法
將2.5g明膠加熱溶于500ml蒸餾水中,*溶解冷卻后加入0.25g硫酸鉻鉀攪勻充分溶解即可使用。方法是將玻片浸泡其中2 min,取出控盡液體入溫箱中烤干備用。此法價格便宜、方法簡單,任何實驗都可以使用,特別適用于大批量的使用,但應注意,如果液體變藍或粘稠狀停用。
3)APES (3-氨丙基-乙氧基甲硅烷)
此法必須現(xiàn)用現(xiàn)配。將洗凈玻片入1:50丙酮稀釋的APES中,浸泡20s,取出稍停再入丙酮或蒸餾水中刷去末結(jié)合的APES晾干即可。用此方法粘合的玻片應垂直烤片不能平拷,否則組織片中易出現(xiàn)氣泡。
切片必須保持切片刀銳利,切片要薄而平整、無皺摺、無刀痕,如有上述問題的切片在進行免疫組化染色都將出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象,切片厚度一般為3~4μm,切好的切片在60℃溫箱中過夜,注意烤片的溫度不宜過高,否則易使組織細胞結(jié)構(gòu)破壞,而產(chǎn)生抗原標記定位彌漫現(xiàn)象。

上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。
標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免檢測服務(wù):進口放免檢測服務(wù),國產(chǎn)放免檢測服務(wù),進口美國鳳凰等放免檢測服務(wù)。
實驗室代測服務(wù):放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。

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