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海藻糖檢測(cè)試劑盒具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)

更新時(shí)間:2019-09-05      瀏覽次數(shù):1090

海藻糖檢測(cè)試劑盒具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)!

 

產(chǎn)品說(shuō)明:
海藻糖存在于大量有機(jī)體中,包括細(xì)菌、藻類、酵母、植物、昆蟲(chóng)和其他無(wú)脊椎動(dòng)物。由于海
藻糖具有*的不同于其他碳水化合物的生物學(xué)特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及
毒性物質(zhì)等惡劣環(huán)境下保護(hù)生物體細(xì)胞蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。

測(cè)定方法采用蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。但是蒽
酮比色法也存在一定缺陷,如果樣本中含有可溶性糖,則會(huì)影響測(cè)定。本試劑盒建議用于除海藻糖
外不含其他可溶性糖樣本的測(cè)定。

 

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿﹑研缽、濃硫酸和蒸餾水。

 

操作步驟:

一、海藻糖提取:
1、 細(xì)菌或細(xì)胞處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入
1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次),室溫
靜置 45min,振蕩 3~5 次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
2、 組織的處理:稱取約 0.1g 樣本,常溫研碎,加入 1mL 提取液,室溫靜置 45min,振蕩 3~5 次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
3、 血清(漿)的處理:吸取約 100μL 血清(漿),加入 0.9mL 提取液,室溫靜置 45min,振蕩 3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取上清。
4、 標(biāo)準(zhǔn)品的處理:標(biāo)準(zhǔn)品用 1mL 雙蒸水溶解,溶液濃度為 10mg/mL,稀釋到 0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/mL。

二、測(cè)定操作表:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 620nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 調(diào)節(jié)水浴鍋至 95 度。

3、 工作液的配制:臨用前在每瓶試劑一中加入 16mL 蒸餾水后,緩慢加入 64mL 濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用。用不完的試劑 4℃保存一周。

4、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:取 0.25mL 標(biāo)準(zhǔn)液和 1mL 工作液至 EP 管中,95 度水浴 10min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,取 1mL 至比色皿中,在 620nm 處測(cè)吸光值 A。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)樣本的濃
度(y)和吸光度(x)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5、 樣本測(cè)定:取 0.25mL 樣本和 1mL 工作液至 EP 管中,95 度水浴 10min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,取 1mL 至比色皿中,在 620nm 處測(cè)吸光值 A。

注意:若吸光值大于 1,請(qǐng)將樣本用提取液稀釋后再測(cè)定,計(jì)算公式中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

 

 

海藻糖檢測(cè)試劑盒具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)!

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