干擾素(IFN)根據(jù)其產(chǎn)生細胞不同和理化性質(zhì)、犐z物學特性的差異可分為α干擾素(IFN-α)、β干擾素(IFN-β)和γ-干擾素(IFN-γ)。它們在機體免疫調(diào)節(jié)、抗病毒感染中具有重要作用。檢測IFN的方法主要分為定量測定(常用elisa)和生物學活性的檢測，后者較為常用。 
　　(一)原理 
　　干擾素能刺激某些指示細胞(如人羊膜上皮細胞Wish株、人喉癌細胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺單層細胞)產(chǎn)生抗病毒蛋白，從而使細胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊，根據(jù)待測樣品不同稀釋度的保護能力，計算出干擾素生物學活性單位。 
　　(二)　操作步驟 
　　　　　　　　96孔培養(yǎng)板中加入不同稀釋度的IFN和標準IFN， 
　　　　　　　　每個稀釋度設3孔，每孔50μl，病毒對照不加IFN 
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　　　　　　　　　　每孔加入100μl 1.5～2×10５／ ml Wish 
　　　　　　　　　　或Hep-2細胞懸液，37℃、CO孵箱培養(yǎng)6～12h， 
　　　　　　　　　　使細胞貼壁為單層 
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　　　　　　　　　　每孔加入50μl含100個　TCID50 VSV, 
　　　 　　　　 細胞對照不加病毒液 
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　　　　　　　　　　根據(jù)細胞病變狀態(tài)，終止培養(yǎng)前3～4h 
　　　　　　　　　　加入5mg／ml MTT, 15μL／孔 
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　　　　　　　　　　加入適量生理鹽水，用滴管輕輕吹吸 
　　　　　　　　　　棄去懸浮病變細胞和死細胞 
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　　　　　　　　　　200μl／孔 二甲亞砜(DMSO)，作用10min 
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　　　　　　　　　　測OD(570nm),表示活細胞中含甲　的量， 
　　　　　　　　　　也可用剛果紅攝入法、結(jié)晶紫染色法 
　　　　　　　　　　　　　測定IFN對活細胞的保護水平 
　　計算: 
　　以保護半數(shù)(50％)細胞免受病毒損害的zui高干擾素稀釋度為1個干擾素活性單位。也可從標準曲線中求得待測樣品的IFN活性單位。 
　　(三)　試劑和器材 
　　1.　VSV 
　　2.　WISH、HeP-2細胞株或人胚肌皮或肺單層培養(yǎng)物。 
　　3.　MTT

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